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恒遠(yuǎn)生物|ELISA曲線擬合的那些事
有很多客戶向我們咨詢ELISA實(shí)驗(yàn)后如何進(jìn)行曲線制作？對于那么多的曲線計算公式，我們該如何選擇最佳的擬合方程呢？恒遠(yuǎn)生物小編給大家總結(jié)：ELISA曲線擬合的那些事。
我們一般可以用軟件繪制也可以通過excel進(jìn)行制作。按照科學(xué)分析方法，如果存在奇異點(diǎn)或者污點(diǎn)，直接采用線性分析不是很好，要對擬合曲線的幾個點(diǎn)進(jìn)行取舍，同時也可以改用雙對數(shù)直線擬合或者四參數(shù)曲線擬合。
那么常用的曲線擬合回歸方程主要為以下幾種：
第一種是直線回歸：直線回歸是最簡單的回歸模型,也是最基本的曲線擬合回歸分析方法，將所有的測試點(diǎn)擬合為一條直線，其擬合函數(shù)方程式為：y=a+bx。但是因?yàn)閷?shí)際實(shí)驗(yàn)中線性極好的情況下可能直線回歸可以獲得較為理想的R2值。那么如果直線線性不理想的情況下如何擬合？作為擁有十多年ELISA產(chǎn)品生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)的企業(yè)，我們會推薦用戶進(jìn)行多項(xiàng)式擬合來改善直線回歸線性不理想的問題。
第二種二次多項(xiàng)式擬合回歸方程：二次多項(xiàng)式成拋物線狀，開口向下或者向上，在很多ELISA實(shí)驗(yàn)中，擬合近似于二次多項(xiàng)式的升段或者降段，所以使用二次多項(xiàng)式擬合時，最好保證取值的范圍都落在曲線的升段或者降段。其擬合函數(shù)方程式為：y=ax2+bx+c
第三種對數(shù)擬合回歸方程：我們將標(biāo)準(zhǔn)品的O.D測值設(shè)為x軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對數(shù)作為y軸，濃度是自變量，O.D.值是因變量進(jìn)行曲線擬合。
最后一種是四參數(shù)擬合回歸方程：競爭法和夾心法都可以用到。它的形狀,根據(jù)情況,可能是一個單調(diào)上升的類似指數(shù),對數(shù),或雙曲線的曲線,也可能是一個單調(diào)下降的上述曲線,還可以是一條S形曲線。它要求X值不能小于0(因?yàn)橹笖?shù)是實(shí)數(shù),故有此要求)。在很多情況下它都可以擬合ELISA的反應(yīng)曲線,所以它也成了ELISA中應(yīng)用最廣的模型之一。
曲線擬合方法雖多，要根據(jù)不同類型ELISA本身的特點(diǎn)，選擇最適合的曲線擬合模型，才能得到最合理的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。一般情況下，需要綜合考慮標(biāo)準(zhǔn)曲線的趨勢走向以及R值的大小以及樣本落值情況。
利用Excel四步輕松搞定 ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作！
第一步：在Excel表格中輸入濃度和OD值
第 二 步：粘貼”數(shù)字部分貼入ELISA Calc
第 三 步：選擇回歸/擬合模型
第 四 步：由 Y 計算 Ｘ
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司擁有自己的實(shí)驗(yàn)室，備有專業(yè)的技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊，長期致力于各種生物試劑，細(xì)胞，血清，ELISA試劑盒的研發(fā)與銷售，實(shí)驗(yàn)提供免費(fèi)代測服務(wù)，并提供精湛的技術(shù)服務(wù)，如果您有實(shí)驗(yàn)上的問題歡迎前來咨詢，為您提供專業(yè)的一對一技術(shù)指導(dǎo)。