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生化試劑盒
- 多功能氧化酶(MFO)試劑盒-可見分光光度法
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恒遠(yuǎn)生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機(jī)鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細(xì)胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標(biāo)儀,分光光度計(jì)和熒光酶標(biāo)儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測服務(wù)和實(shí)驗(yàn)技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗(yàn)、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時(shí)間、極具競爭力的價(jià)格,所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。
中文名稱 |
多功能氧化酶(MFO)試劑盒-可見分光光度法 |
規(guī)格 | 48樣 |
貨號 |
L-752-SH |
價(jià)格 | ¥1000 |
樣本類型 | 血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等 |
檢測范圍 | 詳見說明書 |
檢測方法 |
可見分光光度法 |
貨期 | 3-5天 |
說明書 | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
文獻(xiàn) | 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取 |
注 意:正式測定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出;還可產(chǎn)生激活反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì),導(dǎo)致毒性增強(qiáng),成為致突變物或終致癌物。近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究,對于從分子生物學(xué)水平上進(jìn)一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義。
測定原理:
MFO催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基苯酚,在400nm下有特征吸光值。
自備用品:
分光光度計(jì)、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、氯仿。
試劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體30mL×1瓶,4℃避光保存;
試劑二:粉劑×3管,-20℃保存;臨用前取一管加入2mL水溶解,現(xiàn)配現(xiàn)用。
試劑三:液體30mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:液體80mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提取:
按照組織質(zhì)量(g):提取液(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心20min,取上清,置冰上待測。
測定步驟:
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至400nm,蒸餾水調(diào)零。
2、在10mL管中依次加入如下試劑
試劑名稱(μL) |
測定 |
空白 |
試劑一 |
500 |
500 |
試劑二 |
100 |
100 |
提取液 |
400 |
900 |
樣本 |
500 |
|
混勻,37℃水浴30min |
||
試劑三 |
500 |
500 |
分別加入2.5mL氯仿,充分混勻萃取,靜置10min,取下層氯仿層1.5mL至新的管中。再加入試劑四1.5mL,充分混勻萃取,取上層水相1mL于1mL玻璃比色皿中,400nm下測定吸光值A測定與A空白,△A=A測定-A空白。空白管只需測一管。
MFO活性計(jì)算:
標(biāo)準(zhǔn)曲線:y = 0.0238x + 0.0021,R2 = 0.9997;y,吸光度;x,標(biāo)準(zhǔn)品濃度,單位nmol/mL。
(1)按樣本質(zhì)量計(jì)算
單位定義:每g樣本每分鐘產(chǎn)生1nmol對硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
MFO(nmol/min/g 鮮重)=(△A-0.0021)÷0.0238×V總÷(V樣÷V樣總×W)÷T
=4.2×(△A-0.0021)÷W
(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol對硝基苯酚定義為一個(gè)酶活力單位。
MFO(nmol/min/mg prot)=(△A-0.0021)÷0.0238×V總÷(V樣×Cpr)÷T
=4.2×(△A-0.0021)÷Cpr
V總:最終萃取液體積,1.5 mL;V樣:反應(yīng)中樣品體積,500μL;T:反應(yīng)時(shí)間,30min;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL。
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在線詢價(jià)
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