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抗體保存注意要點
抗體保存也是非常重要的,保存不好不僅影響質(zhì)量,而且關乎著實驗的成敗,今天小編就給大家總結(jié)一下抗體保存的注意要點。
1.收到抗體后需先在 12000 rpm 離心 1-5 分鐘,再打開管蓋進行分裝和保存,如果抗體體積不足50 ul,可延長離心時間至 5 分鐘,從而確??贵w全部離心下來。
2.對于大部分抗體,比較合適的保存方式是分裝后保存在-20℃或-80℃,也可4℃短暫保存1-2周,并不影響抗體活性。
①對絕大多數(shù)抗體來說,保存在-20℃即可。如果抗體在2周內(nèi)會使用,推薦在4℃保存,這是為了避免反復凍融對抗體活性的損害。如果要長期保存則最好是在-20℃或-80℃。當然最關鍵的是按照說明書的推薦來進行保存。但是,腹水形式的產(chǎn)品收到后需立即凍存,因為該類產(chǎn)品含有大量的蛋白酶,長期在4℃保存會導致抗體的降解。
②分裝可以最大程度的降低反復凍融對抗體活性的損害,同時也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。分裝的量以一次實驗用完為好,最少不能少于10ul每份。因為分裝體積越小,抗體的濃度越可能會受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。復融后的分裝抗體如果一次用不完,需將剩余母液保存在4℃,避免再凍起來。
③抗體工作液應該當天配制當天用完,在4℃盡量不要超過1天。
④盡量將抗體保存在冰箱里層,而不是門上。且避免將抗體保存在自動除霜冰箱中。
3.大部分抗體的運輸條件:一般的運輸過程需要1-2周的時間,所以是在4℃的條件下來完成的。4℃運輸最主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害,如果使用干冰運輸,那么收到時抗體是凍起來的,為了分裝就需要解凍,這就多了一次凍融的過程。所以運輸過程中避免干冰運輸。
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