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生化試劑盒

多功能氧化酶(MFO)試劑盒-微量法
恒遠生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀,分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測服務(wù)和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

中文名稱

多功能氧化酶(MFO)試劑盒

規(guī)格 96樣
貨號

L-753-SH

價格 ¥1800
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法

微量法

貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取
文獻 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取

    正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

測定意義: 

多功能氧化酶又稱混合功能氧化酶,可產(chǎn)生降解反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)變?yōu)榈投镜幕驘o毒的物質(zhì)從體內(nèi)排出;還可產(chǎn)生激活反應(yīng),可使原化學(xué)物質(zhì)轉(zhuǎn)化為具有親電子性質(zhì)導(dǎo)致毒性增強,成為致突變物或終致癌物近年來對混合功能氧化酶系與外源性化學(xué)物質(zhì)相互作用的深入研究,對于從分子生物學(xué)水平上進一步了解外源性化學(xué)物質(zhì)的毒作用具有重要意義。

 

測定原理

MFO催化對硝基苯甲醚產(chǎn)生對硝基苯酚,在400nm下有特征吸光值。

自備用品:

酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、蒸餾水、氯仿。

 

試劑組成和配制:

提取液:液體120mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體24mL×1瓶,4℃避光保存;

試劑二:粉劑×3,-20保存;臨用前取一管加入1.5mL水溶解,現(xiàn)配現(xiàn)用。

試劑三:液體24mL×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體64mL×1瓶,4℃保存。

 

粗酶液提?。?/span>

按照組織質(zhì)量(g):提取液mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。12000g 4℃離心20min,取上清,置冰上待測。

 

測定步驟:

1、 酶標儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至400nm

2、在EP管中依次加入如下試劑

試劑名稱(μL

測定

空白

試劑一

200

200

試劑二

40

40

提取液

160

360

樣本

200

 

混勻,37℃水浴30min

試劑三

200

200

分別加入1000μL氯仿,充分混勻萃取,靜置10min,取下層氯仿層0.6mL至新的EP管中。再加入試劑四0.6mL,充分混勻萃取,取上層水相0.2mL96孔板中,400nm下測定吸光值A測定與A空白,A=A

-A空白。空白管只需測一管。

 

MFO活性計算:

標準曲線:y = 0.0119x + 0.0021R2 = 0.9997;y,吸光度x,標準品濃度,單位nmol/mL。

(1)按樣本質(zhì)量計算

單位定義:每g樣本每分鐘產(chǎn)生1nmol對硝基苯酚定義為一個酶活力單位。

MFOnmol/min/g 鮮重)=△A-0.0021÷0.0119×V總÷(V÷V樣總×W)÷T

                        =8.4×△A-0.0021÷W

(2)按樣本蛋白濃度計算

單位定義:每mg組織蛋白每分鐘產(chǎn)生1nmol對硝基苯酚定義為一個酶活力單位。

MFOnmol/min/mg prot=△A-0.0021÷0.0119×V總÷(V×Cpr)÷T

                        =8.4×△A-0.0021÷Cpr

V總:最終萃取液體積,0.6 mLV樣:反應(yīng)中樣品體積,200μLT:反應(yīng)時間,30min;W:樣品質(zhì)量,g;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL


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